Como estudiante de doctorado en Ana María CraigEn el laboratorio de la Universidad de Illinois, Urbana-Champaign, estudié lo que dirigía dos receptores de glutamato a sus posiciones para funciones en las neuronas del hipocampo. Sospechando que el extremo citosólico de la proteína podría ser responsable, intercambié las colas C-terminales de estas proteínas para crear QuimerasPara facilitar la detección de ambas quimeras y de las dos proteínas originales en mis diferentes cultivos celulares, inserté una secuencia para una etiqueta de tres aminoácidos en el extremo N de todas mis proteínas que podía detectar con un anticuerpo.
Julia Darby, hoy tutora privada de distritos escolares de Iowa e Illinois, era una estudiante de posgrado que estudiaba los receptores de glutamato en la Universidad de Illinois, Urbana-Champaign. Después de defender su tesis, se enteró de que algunos de sus métodos podrían no haber funcionado como ella pensaba.
Julia Darby
Cuando expresé las diferentes construcciones proteicas en células neuronales en cultivo, demostré que estas colas C-terminales determinaban la localización de los receptores de glutamato. También obtuve hermosas imágenes que ilustraban que un receptor se encontraba en los axones y el segundo se localizaba a lo largo del axón y en las dendritas, y eran tan impresionantes que Neurona Los seleccionamos para la portada del número cuando publicamos los datos.
Defendí mi doctorado con esta historia de éxito y me trasladé a la Universidad de Washington en St. Louis para buscar un puesto posdoctoral. Aproximadamente un año después, un investigador posdoctoral del laboratorio de Craig siguió mi proyecto para estudiar los receptores nativos. Sus datos mostraron que mi receptor, que aparecía de forma homogénea a lo largo del axón, en realidad se agrupaba en sus lugares en el axón y la sinapsis. Resultó que mi etiqueta introducida interrumpió esta actividad, por lo que las proteínas no interactuaron entre sí como deberían haberlo hecho.
Cuando me enteré de la discrepancia, mi primer pensamiento fue que me alegraba de haber terminado ya mi doctorado. No retiramos el artículo porque, aunque la disposición que observamos era incorrecta, nuestros hallazgos sobre el papel del extremo C eran correctos.
El incidente me sirve para recordar que, en ciencia, hacemos muchas preguntas, pero a menudo la forma en que las respondemos es más importante que los resultados en sí.
Esta entrevista ha sido editada para mayor brevedad y claridad.
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