A El método unicelular de alto rendimiento permite a los investigadores evaluar varios parámetros celulares simultáneamente con la ayuda de láseres.
(1) Toma de muestra
Los científicos preparan muestras como suspensiones de células individuales y marcan los componentes de interés con anticuerpos fluorescentes u otras sondas. El citómetro utiliza bombas para extraer la muestra a través de tubos para analizarla.
(2) Alineación celular
Mediante el enfoque hidrodinámico, el instrumento inyecta la muestra en una corriente de fluido de movimiento rápido que canaliza la muestra en una sola fila a través de un canal estrecho.
(3) Interrogatorio láser
El canal conduce a un punto donde las células individuales se cruzan con uno o más láseres. La muestra medida se deposita en un recipiente para desechos después de pasar este punto.
(4) Detección y dispersión de luz
Cuando una célula comienza a cruzar el rayo láser, dispersa la luz. La luz que atraviesa principalmente la célula se detecta como dispersión frontal y mide el tamaño de la célula. La luz que encuentra obstáculos en la celda cambia de dirección y es detectada por un detector de dispersión lateral, lo que indica la granularidad de la celda. Si los láseres excitan moléculas fluorescentes en la célula, la luz emitida se canaliza a través de espejos dicroicos y filtros de paso de banda para aislar longitudes de onda específicas que se encuentran con detectores específicos para esas longitudes de onda.
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