tLas numerosas células que forman los tejidos de los mamíferos están rodeadas por una intrincada red de proteínas conocida como matriz extracelular (MEC). Juntas, estas proteínas proporcionan a las células un andamio estructural, permiten la comunicación entre células y estimulan la señalización molecular para una amplia gama de actividades celulares, incluida la proliferación, la unión, la diferenciación, la morfología, el movimiento y la muerte.

Como parte de amplios esfuerzos de investigación preclínica, los científicos cultivan y mantienen células de mamíferos in vitro, utilizándolas de innumerables maneras para evaluar cuestiones científicas básicas y traslacionales. Entre las consideraciones más esenciales para generar cultivos celulares reproducibles y confiables se encuentra la imitación de su entorno ECM nativo. Ciertas células pueden hacerlo por sí solas secretando proteínas de la MEC in vitro, pero muchas no pueden hacerlo. Para permitir cultivos viables de dichas células, los científicos recubren las superficies de los dispositivos de cultivo celular con componentes de ECM, incluidos colágeno, laminina, fibronectina, gelatina y vitronectina naturales, así como polímeros sintéticos como poli-L-lisina y poli-L-ornitina.

El comportamiento de diferentes tipos de células en cultivo está influenciado por los sustratos proteicos específicos de la ECM y sus combinaciones. Por ejemplo, recubrir los utensilios de cultivo con laminina, poli-L-lisina y poli-L-ornitina fomenta células madre neurales para adherirse y diferenciarse, permitiendo una amplia gama de estudios.¹ Otros cultivos de células madre, como células madre embrionariasse benefician de los componentes de la ECM que se encuentran en la gelatina natural, una mezcla de proteínas extraída del colágeno que permite aún más la unión celular.² Otras proteínas de la MEC, como la vitronectina, estimulan la diferenciación y migración de varios tipos de células, incluidas Células cancerígenas.³

Para los cultivos celulares que necesitan múltiples tipos de proteínas ECM, la preparación del material de cultivo puede convertirse en un proceso tedioso y largo, considerando que algunos recubrimientos requieren pasos adicionales durante la noche y enjuagues entre recubrimientos. Además, con cada paso de preparación adicional, aumenta el riesgo de contaminar los cultivos celulares. En caso de contaminación, los científicos deben deshacerse de las células y reiniciar todo el proceso, lo que consume recursos valiosos y puede retrasar significativamente los experimentos. Como resultado, los investigadores exploran nuevos productos y herramientas de ECM para optimizar y agilizar este proceso. Por ejemplo, el uso de soluciones de recubrimiento premezcladas e inserciones de placas de cultivo celular prerrevestidas disminuye el tiempo de preparación y mejora la reproducibilidad entre cultivos celulares.

Factores ECM premezclados y listos para usar de MilliporeSigma Proporcionan una ventaja significativa sobre los enfoques de recubrimiento de artículos de cultivo convencionales al reducir la necesidad de múltiples aplicaciones y pasos de lavado. Sus mezclas de soluciones líquidas eliminan la necesidad de incubación durante la noche antes de agregar una capa de un segundo factor de fijación, lo que agiliza los flujos de trabajo y permite realizar ensayos el mismo día. Dado que las concentraciones de trabajo de estos componentes del ECM ya están optimizadas y validadas, los investigadores evitan los pasos de dilución y ahorran tiempo adicional. Además, las tiras de adhesión celular Millicoat® de MilliporeSigma están prerrecubiertas con proteínas ECM y especialmente diseñadas como componentes extraíbles para marcos de placas de cultivo celular. En general, estas soluciones ayudan a los investigadores a eliminar las molestias de las preparaciones de accesorios de cultivos celulares de varios pasos y agilizar los largos flujos de trabajo, ahorrando recursos y tiempo, y mejorando la confiabilidad general de los datos de investigación de cultivos celulares.

Referencias

1. Ahmed S. El cultivo de células madre neurales.. Bioquímica de células J. 2009;106(1):1-6.
2. Kitajima H, Niwa H. Expansión clonal de células madre pluripotentes humanas en una superficie recubierta de gelatina. Biochem Biophys Res Commun. 2010;396(4):933-938.
3. Schneider G, et al. Evidencia de que la vitronectina es un potente factor potenciador de la migración de las células cancerosas acompañadas por fibrinógeno: una visión novedosa de la metástasis de las células cancerosas en los linfáticos y las cavidades corporales con bajo nivel de fibrinógeno. objetivo onco. 2016;7(43):69829-69843.