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Un método de inmunotinción de todo el cuerpo permitió a los investigadores lograr una resolución celular a nivel de todo el organismo.
Los investigadores utilizaron un anticuerpo que se dirige a las neuronas para visualizar todo el sistema nervioso periférico del ratón.
Laboratorio Ertürk, Helmholtz Múnich
Durante años, los investigadores han aspirado a mirar debajo de la piel a nivel del organismo, pero las limitaciones de las tecnologías disponibles obstaculizaron su progreso. Ahora, investigadores dirigidos por Ali Erturkun neurocientífico de Helmholtz Munich, desarrolló un nuevo método químico denominado salvajeDISCO que permite la inmunotinción de todo el cuerpo utilizando anticuerpos disponibles en el mercado.1
El secreto del éxito de wildDISCO es un compuesto que elimina el colesterol que extrae los lípidos de las membranas celulares sin alterar la estructura de la célula. “Esto es una especie de sustancia química mágica”, dijo Jie Luo, investigador postdoctoral en el laboratorio de Ertürk que ayudó a desarrollar el método y fue coautor del artículo. Según Luo, el compuesto ayuda a que los anticuerpos estándar penetren en las células de forma más fácil y homogénea.
El equipo aplicó por primera vez este método para mapear el sistema nervioso periférico del ratón. Después de reparar el cuerpo del ratón, Luo y sus colegas bombearon soluciones que contenían la molécula que elimina el colesterol, seguido de la adición de un marcador panneuronal (PGP9.5) acoplado a una etiqueta fluorescente, a través del sistema circulatorio del ratón. El siguiente equipo hizo todo cuerpo del ratón transparente utilizando un método que Ertürk desarrolló previamente.2 Utilizando microscopía de lámina de luz, tomaron imágenes de todo el cuerpo del ratón y luego unieron las imágenes usando un software para crear una representación 3D de la red neuronal periférica del ratón.
La imagen resultante revela diferentes niveles del sistema nervioso periférico, que el equipo codificó con colores de modo que los nervios más profundos en el cuerpo del animal aparecen en amarillo y rosa, mientras que los nervios más cercanos a la cámara aparecen en tonos azules. Este mapeo de todo el cuerpo permitió al equipo ver claramente cómo se inervan los diferentes órganos, revelando conexiones que pueden ayudar a otros investigadores a comprender mejor el papel de estas proyecciones en los estados de salud y enfermedad.
El etiquetado exitoso motivó al equipo a continuar validando otros anticuerpos utilizando la técnica, dijo Luo, y destacó el potencial de wildDISCO para mejorar la comprensión de los investigadores sobre sistemas biológicos complejos.
Referencias
- Mai H, et al. Biotecnología Nat. 2023;10.1038/s41587-023-01846-0.
- Ertürk A, et al. Protocolo Nacional. 2012;7(11):1983-1995.