¿Qué hay en el nombre?| Artículo
Los métodos basados en el flujo permiten a los investigadores recopilar datos multiparamétricos de células individuales en sus muestras, pero el destino de las muestras depende del instrumento.
Los investigadores a menudo utilizan “citometría de flujo” para referirse a un método de analizando células en un citómetro de flujo que lleva un nombre muy apropiado.1 Sin embargo, el término también abarca técnicas que permiten a los investigadores caracterizar componentes individuales en una muestra o dentro de ella, generalmente células, en una muestra completa de forma rápida y en alta dimensión.
Además del análisis de células, la clasificación celular, a veces denominada clasificación celular activada por fluorescencia (FACS), es otra aplicación común de la citometría de flujo.2 Si bien estas dos técnicas y sus instrumentos son similares, una distinción importante radica en lo que sucede con la muestra después de su análisis.
Los detalles de la citometría de flujo
En la citometría de flujo, una bomba introduce la muestra en el instrumento y orienta las células individuales en una fila india para que cada una pase frente a uno o más láseres. Los científicos dan instrucciones a la computadora para que registre información sobre varios parámetros de la célula, incluido su tamaño y composición aproximada. Los detectores registran información sobre la intensidad y el patrón de dispersión de la luz después de que sale de la célula. Después de la interrogación con láser, los analizadores de celdas de flujo depositan toda la muestra en un receptáculo de desechos en el instrumento.
FACS: Clasificar o no clasificar
Los separadores de células funcionan de manera casi idéntica a los citómetros de flujo hasta que la célula sale del láser. Después de este punto, Los clasificadores de células rompen el flujo de células en gotitas mediante oscilación.3 La computadora calcula rápidamente las características específicas de la célula y, en función de esos parámetros, aplica una carga a la gota individual que contiene la célula. A medida que la gota ahora cargada continúa descendiendo alejándose del láser, pasa a través de placas magnéticas que la atraen o la repelen hacia los tubos de recolección. Los clasificadores actuales pueden separar las células en hasta seis poblaciones diferentes.