Optimización de la disociación de tejidos para la recuperación de células individuales de alto rendimiento

DLa asociación de tejidos en células individuales es una técnica de laboratorio central y vital para aplicaciones ampliamente utilizadas, como la secuenciación de próxima generación o la citometría de flujo. Los científicos que emplean la disociación de tejidos tienen como objetivo aislar rápidamente un gran número de células individuales viables a partir de agregados de tejido y restos celulares con un daño mínimo a los antígenos de la superficie celular. Obtener altos rendimientos de células individuales viables es fundamental para los flujos de trabajo posteriores y la adquisición de datos confiable. Para hacerlo, los investigadores se basan en un procedimiento de varios pasos que incluye interrumpir las conexiones intercelulares y romper el andamiaje fibroso de la matriz extracelular que rodea las células y proporciona soporte estructural a los tejidos.¹ Se debe tener cuidado de lograr el equilibrio adecuado entre implementar suficiente agitación mecánica y química para disociar las células y, al mismo tiempo, evitar un estrés celular indebido que afecte negativamente a la viabilidad.

Optimización de los flujos de trabajo de disociación de tejidos

Los investigadores utilizan varios protocolos para disociar células individuales de diferentes tejidos frescos, cada uno con consideraciones únicas según el tipo y la complejidad del tejido, la heterogeneidad celular, la sensibilidad a la digestión enzimática, la temperatura y las condiciones de almacenamiento de la muestra. Estas variables pueden afectar el rendimiento y la viabilidad de las células disociadas, lo que requiere un enfoque integral y versátil que aborde las consideraciones únicas para la disociación del tejido fresco en una variedad de diferentes tipos de tejidos. Esto es particularmente importante cuando se examinan tejidos para aplicaciones que tienen importancia traslacional. Por ejemplo, en la investigación de descubrimiento y desarrollo de fármacos, donde las variaciones en el rendimiento y la viabilidad celular, así como la integridad del ADN/ARN, pueden alterar sustancialmente las respuestas posteriores a posibles terapias.

Si bien los enfoques tradicionales son útiles, no se adaptan a una amplia gama de tejidos frescos y a menudo requieren equipo especializado y el uso de kits de disociación individualizados que son específicos para tipos de muestras discretos. Los kits de disociación de tejidos múltiples están diseñados para optimizar los protocolos para la disociación de tejidos al estandarizar aspectos clave del proceso de homogeneización y disociación de tejidos, en combinación con instrumentación homogeneizadora de tejidos. Es importante destacar que los kits de disociación de múltiples tejidos y la instrumentación relacionada que tienen adaptabilidad incorporada a las variaciones inherentes del protocolo de disociación de tejidos entre diferentes tipos de tejidos permiten una optimización más fácil y mejores resultados que los enfoques tradicionales.

Una solución versátil y adaptable para la disociación de múltiples tejidos

Tecnologías Bertín Kit de disociación multitejido Precellys es una solución versátil que aborda la complejidad inherente de disociar diferentes tipos de tejidos mediante un enfoque rápido, flexible, eficiente, confiable y rentable. El kit permite la disociación de tejidos unicelulares de tejidos complejos, incluidos el corazón, los pulmones, el hígado, el bazo y el timo de un ratón, para flujos de trabajo de análisis unicelulares posteriores. Una tecnología innovadora y patentada que utiliza perlas para cortar suavemente el tejido en preparación para la homogeneización preserva la viabilidad celular individual y maximiza el rendimiento, con más del ochenta por ciento de viabilidad celular para tejidos ampliamente utilizados.

El kit es compatible con el Homogeneizador táctil Precellys Evolution y es altamente adaptable a diferentes tejidos y sus respectivos protocolos de disociación. El homogeneizador Evolution Touch está equipado para proporcionar agitación de alta energía a las perlas de corte en los tubos del kit, con opciones de velocidad variable según el tipo de tejido. Al eliminar la necesidad de utilizar varios kits o disociadores, el kit de disociación de tejidos múltiples Precellys en combinación con el homogeneizador Evolution Touch agiliza y optimiza la preparación de muestras unicelulares, lo que reduce el tiempo total de manipulación a aproximadamente 50 minutos. En general, estas soluciones innovadoras ayudan a los científicos a eliminar las conjeturas al personalizar los protocolos de disociación de tejidos para diferentes tejidos frescos, optimizar los flujos de trabajo unicelulares posteriores y producir datos confiables de manera eficiente.